在生物醫(yī)學(xué)研究中,國(guó)產(chǎn)細(xì)胞牽張系統(tǒng)為探究細(xì)胞響應(yīng)機(jī)械刺激的機(jī)制提供了關(guān)鍵平臺(tái)。其精準(zhǔn)運(yùn)行依賴于規(guī)范的操作流程。掌握
國(guó)產(chǎn)細(xì)胞牽張系統(tǒng)的科學(xué)使用方法,是確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠、細(xì)胞活性完好的核心保障。

第一步:環(huán)境準(zhǔn)備與設(shè)備檢查
將系統(tǒng)置于潔凈、平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái),遠(yuǎn)離強(qiáng)振動(dòng)與電磁干擾源。檢查電源連接是否牢固,確認(rèn)CO?氣路(如集成供氣)無(wú)泄漏。開(kāi)啟設(shè)備通風(fēng)口,確保散熱良好。佩戴無(wú)菌手套,準(zhǔn)備酒精棉片清潔操作區(qū)域。
第二步:開(kāi)機(jī)自檢與參數(shù)初始化
接通電源,啟動(dòng)控制軟件。系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行電機(jī)歸零、溫度校準(zhǔn)與傳感器檢測(cè)。觀察各模塊狀態(tài)指示燈是否正常。等待培養(yǎng)腔溫度升至37℃、CO?濃度穩(wěn)定在5%,確保內(nèi)部環(huán)境達(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。
第三步:基底安裝與細(xì)胞接種
將預(yù)處理的柔性基底(如PDMS膜)固定于拉伸夾具上,確保邊緣平整無(wú)褶皺。在超凈臺(tái)內(nèi)接種細(xì)胞,密度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定(如1×10?cells/cm?)。靜置2–4小時(shí),待細(xì)胞充分貼壁后,再將培養(yǎng)裝置輕柔移入培養(yǎng)腔。
第四步:參數(shù)設(shè)置與程序編程
在控制界面選擇實(shí)驗(yàn)?zāi)J剑?/div>
靜態(tài)拉伸:設(shè)定恒定應(yīng)變值(如10%);
動(dòng)態(tài)拉伸:設(shè)定頻率(如1Hz)、波形(正弦波)、周期(如24小時(shí))。
可創(chuàng)建多階段程序,模擬生理或病理應(yīng)力變化。確認(rèn)參數(shù)無(wú)誤后保存方案,避免誤操作。
第五步:?jiǎn)?dòng)運(yùn)行與實(shí)時(shí)監(jiān)控
關(guān)閉培養(yǎng)腔門,啟動(dòng)牽張程序。觀察電機(jī)運(yùn)行是否平穩(wěn),有無(wú)異常噪音。通過(guò)顯微接口連接倒置顯微鏡,定期檢查細(xì)胞形態(tài)與基底狀態(tài)。軟件實(shí)時(shí)顯示拉伸波形、溫度與CO?濃度,確保過(guò)程穩(wěn)定。
第六步:實(shí)驗(yàn)結(jié)束與設(shè)備維護(hù)
程序結(jié)束后,系統(tǒng)自動(dòng)停止拉伸。緩慢釋放基底張力,取出培養(yǎng)裝置。在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行后續(xù)處理(如染色、固定或RNA提?。?。關(guān)閉軟件,斷開(kāi)電源。清潔培養(yǎng)腔內(nèi)表面與夾具,用75%酒精擦拭消毒,防止交叉污染。